خواص ضدباکتریایی وآنتی اکسیدانی

 

فهرست مطالب

عنوان                                                                                              صفحه

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فصل اول: مقدمه و تئوری
بخش اول: کلیات گیاه­شناسی
مقدمه
1-1- تیره آرالیاسه			4
1-1-1-مشخصات جنس هدرا			5
1-1-1-1- هدرا پاستوچووی			7
1-1-2- تیره نخود			9
1-1-2-1–مشخصات جنس لیلکی			10
1-1-3– شیمی جنس  عشقه			12
1-1-4–شیمی جنس لیلکی			13
بخش دوم: روغن­های اسانسی و اثرات دارویی
2-2- روغنهای اسانسی			15
1-2-1- تعریف			15
1-2-2– شیمی روغن های اسانسی			17
1-2-3 –روش های تهیه و استخراج روغن های اسانسی			18
1-2-3-1– روش های تقطیر			18
1-2-3-1-1- تقطیر با آب			19
1-2-3-1-2- تقطیر با بخار مستقیم			19
1-2-3-1-3- تقطیر با آب و بخار آب			20
1-2-3-2- استخراج توسط حلال			21
1-2-3-3- استخراج به کمک فشار			21
1-2-3-4- استخراج با چربی سرد			21
1-2-3-5- استخراج با چربی داغ			22
1-2-3-6- استخراج به کمک گازها			22
عنوان			صفحه
1-2-4- طبقه بندی اسانس ها			23
1-2-4-1- اسانس های طبیعی			23
1-2-4-2- اسانس های شبه طبیعی			23
1-2-4-3- اسانس های مصنوعی			24
1-2-5- کاربرد روغن های اسانسی			24
1-2-6- اثرات دارویی اسانس ها			25
1-2-6-1- اثرات گوارشی			25
1-2-6-2- اثرات قلبی و عروقی			25
1-2-6-3- اثرات تنفسی			25
1-2-6-3- اثر کاهش قند خون			26
1-2-6-4- اثرات ضد میکروبی و ضد قارچی			26
1-2-6-5- اثرات پوستی			26
1-3- عصاره گیری			27
1-3-1- استخراج مواد متشکله دارویی			27
1-3-2- روش های عصاره گیری (استخراج)			28
1-3-2-1- روش خیساندن			28
1-3-2-2- پرکولاسیون			28
1-3-2-3- هضم			29
1-3-2-4- روش دم کردن			29
1-3-2-5- روش سوکسله			29
بخش سوم: شیمی ترپنوییدها
1-3-1– شیمی ترپنوییدها			31
1-3-2– طبقه بندی ترپنوییدها			32
1-3-2-1– همی ترپنوییدها			32
1-3-2-2–مونو ترپنوییدها			32
1-3-2-3–  سزکویی ترپنوییدها			34
1-3-2-4– دی ترپنوییدها			36
1-3-2-5– سستر ترپنوییدها			37
عنوان			صفحه
1-3-2-6– تریترپنوییدها		37
1-3-2-7– تترا ترپنوییدها	38
1-3-2-8 –پلی ترپنوییدها	38

بخش چهارم: اثرات آنتی باکتریال وآنتی اکسیدانت

1-4-آنتی اکسیدان ها                                                                                                     40

1-4-1-تعریف علمی                                                                                                    40

1-4-1-1- ویژگی های آنتی اکسیدان ها                                                                           40

1-4-1-2-  دامنه فعالیت آنتی اکسیدان ها                                                                          42

1-4-1-3- ویژگی های آنتی اکسیدان های سنتزی                                                               43

1-5- آنتی باکتریال ها                                                                                                    44

1-5-1-  بررسی اثرات ضد میکروبی عصاره                                                                       44

1-5-1-1– شرح مختصری درباره میکرو ارگانیسم های مورد آزمایش45

1-5-1-1-1– استافیلوکوکوس اورئوس                                                                            45

1-5-1-1-2– باسیلوس سوبتیلیس                                                                                   45

1-5-1-1-3– اشریشیاکلی                                                                                             46

1-5-1-1-4- پسودوموناس آئروژینوزا                                                                           46

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فصل دوم: بخش تجربی
2-1- اسانس گیری	49
2-1-1- مواد و وسایل	49
2-1-1-1-گیاهان مورد استفاده	49
2-1-1-2- دستگاه­های مورد استفاده	49
2-1-2-روش کار	50
2-1-2-1- استخراج اسانس	50
2-1-2-2- جدا سازی و شناسایی مواد تشکیل دهنده روغن اسانسی گیاه	52
2-2-عصاره گیری	54
2-2-1- مواد و وسایل	54
2-2-1-1-گیاه مورد استفاده	54
2-2-1-2- مواد مورد استفاده	54
عنوان	صفحه
2-2-1-3- دستگاه مورد استفاده	54
2-2-2- بررسی شیمیایی گیاه عشقه	54
2-2-3- جداسازی مواد تشکیل دهنده ی عصاره	55
2-3- بررسی اثرات آنتی باکتریال	55
2-3-1- مواد و وسایل	55
2-3-1-1 گیاه مورد استفاده	55
2-3-2-1- مواد مورد نیاز	55
2-3-2-2- وسایل مورد نیاز	55
2-3-2- روش کار	56
2-3-2-1- تهیه ی محیط کشت LB	56
2-3-2-2- باکتری ها و نحوه آماده سازی کشت باکتریایی در LB	56
2-3-2-3- بررسی فعالیت ضد باکتریایی عصاره گیاهی به روش حداقل غلظت بازدارندگی رشد باکتری ها	57
2-4- بررسی فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره	58
2-4-1- مواد و وسایل	58
2-4-1-1- گیاه مورد استفاده	58
2-4-1-2- مواد مورد نیاز	58
2-4-1-3- وسایل مورد نیاز	58
2-4-2- اصول کار روش DPPH	59
2-4-2-1- ارزیابی میزان توانایی به دام اندازی رادیکال DPPH	60
2-4-3- ارزیابی محتوای فنولی	60
2-4-3-1- تعیین محتوای کلی فنولی	61
2-4-4- ارزیابی محتوای فلاونوییدها	62
2-4-4-1 تعیین محتوای کلی فلاونوییدی	63
فصل سوم: بحث و نتیجه گیری
3-1- نتایج آزمایشگاهی	65
3-1-1- آنالیز و شناسایی کمی و کیفی اجزای موجود در اسانس	66
3-2- بررسی ترکیبات شناسایی شده از اسانس گیاهان	78
عنوان	صفحه
3-5 – نتایج بررسی فعالیت آنتی اکسیدانت عصاره گیاهان مورد بررسی	97
3-5-1- داده های روش DPPH	97
3-5-2- داده های روش فنولی	102
3-5-3- داده های روش فلاونوییدی	103
3-7- نتیجه گیری	105
3-7- پیشنهاداتی برای کارهای آینده	106
فهرست شکل­ها
عنوان	صفحه
فصل اول– بخش اول
شکل 1-1–گیاه عشقه	9
شکل 1-2– گیاهلیلکی	12
شکل 1-2-1– دستگاه تقطیر با بخار مستقیم	21
شکل 1-2-2– دستگاه استخراج روغن اسانسی به کمک گاز دی اکسید کربن	24
فصل دوم: بخش تجربی
شکل 2-1– نمایی از دستگاه اسانس گیر (کلونجر)	51
شکل 2-2– نمایی از لوله های حاوی محیط کشت مایع LB	57
فصل سوم: بحث و نتیجه گیری
شکل 3-1- نمودار ترکیبات تشکیل دهنده روغن­های­ اسانسی برگ، ساقه ومیوه گیاه عشقه	75
شکل 3-2- نمودار ترکیبات تشکیل دهنده روغن­های اسانسیمیوه گیاه لیلکی	77
شکل 3-3–نمودار فعالیت آنتی اکسیدان عصاره اتیل استات گیاه عشقه به روش DPPH	98
شکل 3-4- نمودار فعالیت آنتی اکسیدان عصاره متانولی گیاه عشقه به روش DPPH	99
شکل 3-5- نمودار فعالیت آنتی اکسیدان عصاره استونی گیاه عشقه به روش DPPH	100
شکل 3-6- نمودار فعالیت آنتی اکسیدان عصاره اتانولی گیاه عشقه به روش DPPH	101

 

فهرست شماها

 

 

 

 

 

 

 

عنوان		صفحه
شمای 1-3-1– مسیر بیوسنتز  مونوترپنوییدها		34
شمای 1-3-2– مسیر بیوسنتز سزکویی ترپن ها		36
شمای 1-3- 3–  مسیر سنتز  ژرانیل پیرو فسفات		37

 

فهرست جدول­ها

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

عنوان	صفحه
فصل اول- بخش اول
جدول 1-1-جنسهای مهم خانواده آرالیاسه	5
جدول1-1-2- گونه های جنس هدرا	7
فصل اول-بخش سوم
جدول1-3-1- طبقه ­بندی ترپنوییدها بر اساس تعداد واحد ایزوپرنی	33
فصل دوم
جدول 2-1- گیاهان مورد بررسی	49
جدول 2-2- مقدار و اندام گیاهان مورد بررسی	50
جدول 2-3- زمان هایبازداری آلکان های نرمال بر روی ستونHP-5 MS	53
فصل سوم: بحث و نتیجه گیری
جدول 3-1–درصد اسانس و روش استخراج	65
جدول 3-2- ترکیبات تشکیل دهنده روغن­های اسانسی برگ، ساقه و میوه گیاه  عشقه	71
جدول 3-3- ترکیبات تشکیل دهنده روغن­های اسانسی میوه لیلکی	76
جدول3-4- تاثیر غلظت مختلف عصاره اتانولی گیاه عشقه بررشد باکتری‌ها بهکمک روش حداقل غلظت مهار کنندگی	96
جدول3-5- فعالیت آنتی اکسیدانیاتیل استات برگ و میوه گیاه عشقه با روش DPPH	97
جدول3-6- فعالیت آنتی اکسیدانی متانولی برگ و میوه گیاه عشقهبا روش DPPH	99
جدول3-7- فعالیت آنتی اکسیدانی استونی برگ و میوه گیاه عشقه با روش DPPH	100
جدول3-8- فعالیت آنتی اکسیدانی اتانولی برگ و میوه گیاهعشقهبا روش DPPH   جدول 3-9-درصد ترکیبات فنولی	101   103
جدول 3-10-درصد ترکیبات فلاونوییدی	101

 

فهرست طیف­ها

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فصل سوم: بحث و نتیجه گیری
طیف 3-1- کروماتوگرام گازی اسانس برگ عشقه	67
طیف­ 3-2- کروماتوگرام گازی اسانس ساقه عشقه	68
طیف­ 3-3- کروماتوگرام گازی اسانس میوهعشقه	69
طیف­ 3-4- کروماتوگرام گازی اسانس میوه لیلکی	70
طیف 3-5- طیف جرمی نمونه جداسازی شده 4,2 نونادینال	79
طیف 3-6- طیف جرمی استاندارد 4,2 نونادینال	79
طیف 3-7- طیف جرمی نمونه جداسازی شده آلفا- پینن	81
طیف 3-8- طیف جرمی استاندارد آلفا- پینن	81
طیف 3-9- طیف جرمی نمونه جداسازی شده لیمونن	83
طیف 3-10- طیف جرمی استاندارد لیمونن	83
طیف 3-11- طیف جرمی نمونه جداسازی شده ترانس بتا فارنسن	85
طیف 3-12- طیف جرمی استاندارد ترانس بتا فارنسن	85
طیف 3-13- طیف جرمی نمونه جداسازی شده  تیمول	87
طیف 3-14- طیف جرمی استاندارد تیمول	87
طیف 3-15- طیف جرمی نمونه جداسازی شده بتا بیسابولن	89
طیف 3-16- طیف جرمی استاندارد بتا بیسابولن	89
طیف 3-17- طیف جرمی نمونه جداسازی شده لیینولئیک اسید	91
طیف 3-18- طیف جرمی استاندارد لیینولئیک اسید	91
طیف 3-92- طیف جرمی نمونه جداسازی شده پالمتیک اسید	93
طیف 3-20- طیف جرمی استاندارد پالمتیک اسید	93

 

لیست علایم و اختصارات

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Nanometer	nm
Part per million	ppm
Wave number	Cm -1
Nuclear magnetic resonance	NMR
Hydrazyl1,1-diphenyl-2-picryl	DPPH
Minimum  Bacteria  concentration	MBC
Minimum  Inhibitory  Concentration	MIC
Luria – Betani medium	LB
Ultraviolet	Uv
Visible	Vis
Propyl Gallate	PG
Butylatedhydroxyanisole	BHA
Butylatedhydroxytoluene	BHT

 

چکیده:

ترکیبات شیمیایی روغن­های اسانسی استخراج شده به روش تقطیر با آب ازبرگ، ساقه و میوه گیاه عشقه (هدرا پاستوچووی) و میوه گیاه لیلکی با دستگاه GC/MS شناسایی شدند. ترکیبات عمده در روغن­های اسانسی گیاه عشقه  شامل: 4,2 نونادینال (42/16- 6/2 %)، آلفا- پینن (33/0- 25/2 (،بتا فارنسن( 97/6 -35/11 )، آلفا-كدرن (65/0-34/5 ) و گیاه لیلكی شامل پالمیتیک اسید (3/39%) لینولییک اسید (2/5%) اوكتا دكانوییک اسید (3/3%) می­باشند. همچنین فعالیت ضد باکتریایی عصاره اتانولی روغن­های اسانسی برگ، ساقه و میوه  گیاه عشقه با روش MIC بررسی شدند كه عصاره های این گیاه اثرات و ضد باکتریایی مطلوبی از خود نشان دادند. فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره گیاه عشقه با روش های DPPH، فنولی و فلاونوییدی اندازه ­گیری شده است و سپس با فعالیت آنتی­اکسیدانی ویتامین) C آنتی­اکسیدان طبیعی) و  BHT (آنتی اکسیدان سنتزی) مقایسه شدند. با توجه به بررسی های انجام شده بر روی فعالیت آنتی اکسیدانی، عصاره گیاه عشقه فعالیت آنتی اکسیدانی بالایی نشان داده و این بی شک با ترکیبات مهم و مفید موجود در این گیاه مرتبط است.

مقدمه :                        

« و سپس از میوه های شیرین تغذیه کنید و راه پروردگارتان را به  اطاعت بپویید، آنگاه از درون آن میوه ها شربت شیرینی به رنگ های مختلف بیرون آید که در آن شفاء مردمانست. در این کار نیز قدرت خدا بر متفکران پیداست.» ( نحل، 69 )