به منظور شناسایی نماتدهای انگل گیاهی ریزوسفر مزارع خانواده کدوئیان استان خراسان رضوی، طی سال های 1388 ، 1389و 1390 تعداد 54 نمونه خاک از مزارع گیاهان خانواده کدوئیان استان جمع آوری گردید. نمونه های خاک به آزمایشگاه گیاه پزشکی دانشگاه فردوسی مشهد منتقل شده و در دمای 4 درجه سانتی گراد نگهداری شدند.سپس مرحله ی شستشوی خاک ها واستخراج نماتدها با بهره گرفتن از روش تغییر یافته تلفیق الک و سانتریفیوژ جن کینز(Jenkins, 1964 ) انجام شد ونماتدهای استخراجی طبق روش دگریس (De Grisse, 1969 ) تثبیت  و به گلیسیرین منتقل شدند. سپس از آنها اسلایدهای میکروسکوپی توسط میکروسکوپ نوری جهت بررسی مشخصات مرفولوژیکی تهیه شد. درنهایت تعداد 1800 نماتد از 54 نمونه خاک،پس از اندازه گیری  های لازم و رسم تصاویر مورد نیاز شناسایی شدند که با بهره گرفتن از منابع و کلیدهای موجود توانستند در 23 گونه نماتد متعلق به 15 جنس طبقه بندی شدند که عبارتند از:

 

Aphelenchus avenae, A. isomerus, Basiria graminophila, Boleodorus thylactus, Ditylenchus medicaginis, D. tenuidens, Filenchus cylindricaudus, F. thornei, F. vulgaris, ، Helicotylenchus egyptiensis, H. pseudorobustus, Geocenamus  tenuidens, Irantylenchus clavidorus, ، Merlinius brevidens, ، Meloidogyne javanica ,، Neopsilenchus  magnidens, Pratylenchus coffeae, ، P. thornei, P. neglectus, Psilenchus iranicus, Tylenchorhynchus goffarti, T. solani, Zygotylenchus  guevarai

از بین جنس ها و گونه های شناسایی شده چهارگونه ، Psilenchus iranicus ، F. vulgaris ، Geocenamus tenuidens و  Meloidogyne javanica بیشترین فراوانی را در مزارع استان برخوردار بودند.در ادامه تحقیق، به منظور شناسایی نماتدهای ریشه گرهی مزارع کدوئیان استان تعداد 8 نمونه خاک و ریشه آلوده به نماتد از مناطق مختلف استان جمع آوری گردید. که در این نمونه ها گونه Meloidogyne javanica جداسازی و شناسایی گردید.

 

کلید واژه‌ها: خراسان رضوی،  ریزوسفر ، کدوئیان ، نماتدهای انگل گیاهی

فهرست مطالب

فصل اول. 1

مقدمه و اهمیت تحقیق. 1

1-1-گیاهشناسی خانواده کدوئیان. 1

1-1-1-گیاه شناسی خربزه ، منشأ و تاریخچه. 1

1-1-2-گیاه شناسی خیار، منشأ و تاریخچه. 4

1-1-3-گیاه شناسی طالبی، منشأ و تاریخچه. 3

1-1-4-گیاه شناسی کدو، منشأ و تاریخچه. 3

1-1-5-گیاه شناسی هندوانه ، منشأ و تاریخچه. 4

1-2- نیازهای محیطی خانواده کدوئیان. 4

1-3- بررسی وضعیت سطح زیر کشت، عملکرد و تولید در جهان. 5

1-4- بیماری های مهم کدوئیان. 6

1-5- اهمیت و اهداف تحقیق. 6

فصل دوم. 9

بررسی منابع. 9

2-1- اهمیت نماتد های انگل گیاهی بر روی خانواده کدوئیان. 9

2-2- مطالعات انجام شده در جهان و ایران. 10

فصل سوم. 15

مواد و روش ها 15

3-1- نمونه برداری.. 15

3-2- استخراج نماتدها 18

3-2-1- استخراج نماتدهای کرمی شکل از خاک.. 18

از ریشه. 19

3-4- کشتن، ثابت کردن و انتقال نماتدها به گلیسیرین خالص…. 20

3-5- تهیه اسلاید های میکروسکوپی.. 21

3-5-1- تهیه اسلایدهای دایم از نماتدهای کرمی شکل. 21

و تهیه اسلاید میکروسکوپی.. 22

3-6- مشخصات مورفولوژیک و مورفومتریک مورد استفاده در تشخیص گونه ها 22

3-6-1- مورفومتری و رسم تصاویر. 24

3-7- جداسازی نماتد های ریشه گرهی و خالص سازی آنها 26

: 27

3-8-1-انجام واکنش PCR : 27

3-8-2-روش دستی PCR.. 28

3-8-3- تشخیص فرآورده های PCR.. 29

فصل چهارم. 31

نتایج و بحث.. 31

4-1- نتایج.. 31

4-2- شرح جنس ها و گونه های شناسایی شده 32

 

1865. 32

Bastian , 1865. 32

Anderson & Hooper,1980. 33

1959. 34

siddiqi,1959. 35

1941. 37

Thorne, 1941. 37

1936. 39

Wasilewska, 1965. 39

Gritzenko, 1971. 40

Andrassy,1954 (Mey,1961) 42

(wu,1969) siddiqi, 1986. 43

(Thorne & Malek,1968)Siddiqi,1986. 44

(Brzeski,1963) Lownsbery ,1985. 46

1968. 47

  , Thorne & Malek, 1968. 48

1945. 51

,  Tarjan, 1964. 52

(Steiner,1964) Golden ,1956. 53

1972. 55

,  Kheiri,1972. 56

1892. 57

(Treub,1885) chitwood, 1949. 59

1970. 61

(Allen,1955) siddiqi,1970. 61

1968. 63

(Thorne,1949) Thorne & Malek, 1968. 64

1936. 66

(Zimmermann, 1898)Filipjev & Schuurmans Stekhoven, 1941. 66

(Rensch, 1924) Filipjev & Schuurmans stekhoven, 1941. 67

, Sher & Allen ,1953. 68

1921. 70

, Kheiri,1970. 71

1913. 72

, Sturhan, 1966. 74

, Gupta & Uma, 1982. 74

1963. 76

(Tobar jimenz, 1963) Braun & Loof,1966. 76

فصل پنجم. 79

نتیجه گیری کلی و پیشنهادات.. 79

5-1- نتیجه گیری کلی.. 79

5-2- پیشنهادات.. 79

منابع   81

فهرست جداول

جدول3-1: مکان، زمان و نوع آبیاری در نمونه های خاک جمع آوری شده 16

جمع آوری شده 19

جدول 3-3-: اجزاﺀ واکنش PCR برای ژن ITS. 28

جدول 3-4-: برنامه PCR مورد استفاده برای ژن ITS. 29

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 34

(اندازه ها برحسب میکرومتر). 36

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 38

از استان خراسان رضوی(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 42

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 47

از استان خراسان رضوی (اندازه ها بر حسب میکرومتر). 50

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 55

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 57

  از استان خراسان رضوی (اندازه ها بر حسب میکرومتر). 60

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 63

s (اندازه ها بر حسب میکرومتر). 65

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 70

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 72

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 75

(اندازه ها بر حسب میکرومتر). 77

فهرست اشکال

– نقشه مکان های نمونه برداری توسط دستگاه GPS. 17

– نتیجه الکتروفورز محصول PCR ونمایشگر محدوده ی مارکر. 30

مقدمه و اهمیت تحقیق

 

1-1-گیاهشناسی خانواده کدوئیان

 

1-1-1-گیاه شناسی خربزه ، منشأ و تاریخچه

 

نام علمی خربزه Cucumis melo L.

عقیده کلی بر این است که منبع اولیه خربزه  آسیا است و چون شاهدی دال بر کاشت آن در زمان های قدیم موجود نیست ، احتمالاً در زمان های قدیم کاشت نمی شده است .