پایان نامه:بررسی تاثیر کشت همزمان سلولهای مزانشیمال مجاور شده با ویتامینD3 روی قابلیت فاگوسیتوز و انفجار تنفسی نوتروفیلهای خون محیطی در رت. |
فهرست
صفحه | عنوان | ردیف |
1 | فصل اول: مقدمه | 1 |
2 | مقدمه | 1-1 |
4 | فصل دوم: کلیات | 2 |
5 | سلول بنیادی و تاریخچه | 2-1 |
6 | تعریف کلی سلول بنیادی | 2-2 |
6 | تقسیم بندی سلولهای بنیادی | 2-3 |
6 | تقسیم بندی بر اساس قدرت تمایزی | 2-3-1 |
7 | تقسیم بندی بر اساس منشاء | 2-3-2 |
8 | تمایز سلولهای بنیادی | 2-4 |
8 | منابع سلولهای بنیادی | 2-5 |
10 | شاخص های سطحی سلولهای بنیادی | 2-6 |
10 | سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-7 |
10 | مقدمه | 2-7-1 |
11 | آنتی ژنهای فنوتیپیک و ویژگی سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-7-2 |
11 | منبع سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-7-3 |
12 | جداسازی سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-7-4 |
12 | مکانیسمهای انعطاف پذیری سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-7-5 |
13 | خودنوزائی یا خودتجدیدی سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-7-6 |
13 | تمایز سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-7-7 |
14 | محرکهای آزمایشگاهی تاثیر گذار بر تمایز سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-7-8 |
14 | مورفولوژی سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-7-9 |
14 | تاثیر سلول بنیادی مزانشیمی بر روی سیستم ایمنی | 2-7-10 |
15 | تاثیر سلولهای بنیادی مزانشیمی بروی لنفوسیتهایT | 2-7-10-1 |
15 | تاثیر سلولهای بنیادی مزانشیمی برسلولهایT تنظیمی | 2-7-10-2 |
15 | تاثیر سلولهای بنیادی مزانشیمی بر لنفوسیت B | 2-7-10-3 |
16 | تاثیر سلولهای بنیادی مزانشیمی برسلولهای عرضه كننده آنتی ژن | 2-7-10-4 |
16 | حفاظت عصبی سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-8 |
17 | فاکتورهای سرکوب سیستم ایمنی سلولهای مزانشیمی | 2-9 |
19 | نحوه کاربرد سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-10 |
19 | استفاده درمانی از سلولهای بنیادی مزانشیمی | 2-11 |
20 | سیستم ایمنی | 2-12 |
20 | اجزای سیستم ایمنی | 2-12-1 |
21 | التهاب | 2-12-2 |
21 | نوتروفیل | 2-12-3 |
22 | گرانولهای نوتروفیل | 2-12-4 |
22 | فاگوسیتوز | 2-12-5 |
24 | انفجار تنفسی | 2-12-6 |
25 | آنزیم های تجزیه کننده | 2-12-7 |
25 | فعال شدن نوتروفیل | 2-12-8 |
25 | پذیرندههای سطحی نوتروفیل | 2-12-9 |
26 | سرنوشت نوتروفیلها | 2-12-10 |
26 | انواع مرگ سلولی
|
2-13 |
26 | آپوپتوز | 2-13-1 |
27 | مسیرهای آپوپتوزی | 2-13-2 |
29 | ویتامین | 2-14 |
29 | انواع ویتامین | 2-14-1 |
30 | ویتامین D | 2-14-2 |
32 | فصل سوم: مواد و روش کار | 3 |
33 | طرز تهیه محیط کشت DMEM | 3-1 |
34 | طرز تهیه محیط کشت RPMI | 3-2 |
35 | تعیین زندهمانی و شمارش سلول به روش تریپان بلو | 3-3 |
36 | جدا سازی وکشت سلول بنیادی مزانشیمال مغز استخوان رت | 3-4 |
38 | تریپسینه کردن وپاساژ دادن سلولها | 3-5 |
39 | جداسازی نوتروفیل | 3-6 |
41 | تیمار سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت با ویتامین D3 | 3-7 |
41 | مجاورسازی سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت تیمار شده با ویتامین D3 و مایع رویی آنها با نوتروفیل های جدا شده از خون محیطی رت | 3-8 |
41 | مجاورسازی سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت تیمار شده با ویتامین D3 با سلولهای نوتروفیل | 3-8-1 |
41 | مجاور سازی مایعرویی سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان تیمار شده با ویتامین D3 با سلولهای نوتروفیل | 3-8-2 |
42 | فاگوسیتوز مخمر | 3-9 |
42 | آماده سازی سوسپانسیون مخمر | 3-9-1 |
43 | روش انجام فاگوسیتوز | 3-9-2 |
45 | سنجش انفجار تنفسی توسط احیاء نیتروبلوتترازولیوم (NBT) | 3-10 |
46 | سنجش زندهمانی سلول نوتروفیل در مواجه با سلولهای بنیادی مزانشیمی و مایع رویی آن | 3-11 |
47 | آنالیز آماری | 3-12 |
48 | فصل چهارم: نتایج | 4 |
49 | نتایج مجاورسازی سلول مزانشیمی تیمار شده و سلول نوتروفیل | 4-1 |
49 | ارزیابی قابلیت انفجار تنفسی(NBT) | 4-1-1 |
49 | ارزیابی فاگوسیتوز | 4-1-2 |
50 | ارزیابی آپوپتوز | 4-1-3 |
51 | نتایج مجاورسازی مایع رویی سلول مزانشیمی تیمار شده و سلول نوتروفیل | 4-2 |
51 | ارزیابی قابلیت انفجار تنفسی(NBT) | 4-2-1 |
52 | ارزیابی فاگوسیتوز | 4-2-2 |
53 | ارزیابی آپوپتوز | 4-2-3 |
56 | فصل پنجم: بحث و پیشنهادات | 5 |
57 | بحث | 5-1 |
60 | پیشنهادات | 5-2 |
61 | فصل ششم: منابع | 6 |
62 | منابع | 6-1 |
73 | چکیده انگلیسی |
فهرست نمودارها
صفحه | عنوان | ردیف |
49 | ارزیابی قابلیت انفجار تنفسی سلولهای نوتروفیل مجاور شده با سلولهای مزانشیمی تیمار شده با غلظتهای متفاوت ویتامین D3 در زمانهای مختلف | 4-1 |
50 | ارزیابی قابلیت فاگوسیتوز سلولهای نوتروفیل مجاور شده با سلولهای مزانشیمال تیمار شده با غلظتهای متفاوت ویتامین D3 در زمانهای مختلف | 4-2 |
51 | ارزیابی میزان آپوپتوز سلولهای نوتروفیل مجاور شده با سلولهای مزانشیمال تیمار شده با غلظتهای متفاوت ویتامین D3 در زمانهای مختلف | 4-3 |
52 | ارزیابی میزان انفجار تنفسی سلولهای نوتروفیل مجاور شده با مایعرویی سلولهای مزانشیمی تیمار شده با غلظتهای متفاوت ویتامین D3 در زمانهای مختلف | 4-4 |
52 | ارزیابی میزان فاگوسیتوز سلولهای نوتروفیل مجاور شده با مایعرویی سلولهای مزانشیمی تیمار شده با غلظتهای متفاوت ویتامین D3 در زمانهای مختلف | 4-5 |
53 | ارزیابی میزان آپوپتوز سلولهای نوتروفیل مجاور شده با مایعرویی سلولهای مزانشیمی تیمار شده با غلظتهای متفاوت ویتامین D3 در زمانهای مختلف | 4-6 |
فهرست تصاویر
صفحه | عنوان | ردیف |
54 | ارزیابی میزان مرگ و بقا سلولهای نوتروفیل تیمار شده با سلولهای بنیادی مزانشیمی | 4-1 |
54 | پاساژ سلولهای آسپیره شده از مغز استخوان. تغییر شکل این سلولها پس از پاساژ سوم کاملا مشهود می باشد | 4-2 |
55 | ارزیابی میزان فاگوسیتوز سلولهای نوتروفیل تیمار شده با سلولهای مزانشیمی | 4-3 |
چکیده فارسی
در مطالعات گذشته به نقش مهم ویتامینD3 در تنطیم رشد سلولهای مزانشیمالاشاره شده است. سلولهای بنیادی مزانشیمی به دلیل توانایی چندگانه و نقش تنظیمی بر روی سیستم ایمنی، جهت اهداف درمانی مناسب میباشند. از طرفی به نظر میرسد که ریز محیطی که سلولهای بنیادی مزانشیمی در آن قرار گرفته اند، در نهایت بر وضعیت سلولهای نوتروفیل مرتبطباآنهاموثرخواهدبود. مطالعه حاضر با هدف تاثیر سلولهای بنیادی مزانشیمیتیمار شده باویتامین D3و فاکتورهای محلول ناشی از آن بر قابلیتهای نوتروفیلها انجام شده است.پس از جداسازی سلولهای بنیادی مزانشیمی از مغز استخوان رتها، اقدام به تیمار سلولهای مزبور با ویتامین D3 در غلظتهای50، 100 و 200 نانومولاربه مدت زمان24، 48 و 72 ساعت شد. سپس سلولهای مزبور و مایع رویی آنها به صورت جداگانه با سلولهای نوتروفیل به مدت4ساعت مجاور گردیدند. آنگاه قابلیت فاگوسیتوز با مخمر اپسونیزه، شدت انفجار تنفسی به کمک تست احیا NBT ومیزان زنده مانی به شیوه رنگ آمیزی آکریدین اورنج /پروپیدیوم یدید در نوتروفیلها ارزیابی شد.داده ها با بهره گرفتن از آزمون One-Way ANOVA و تست Tukey در سطح معنیداری (05/0p<) آنالیز گردید. قابلیت فاگوسیتوز سلولهای نوتروفیل درهمه تیمارها نسبت به گروه کنترلافزایش معنیداری نشانداد. شدت انفجار تنفسی نوتروفیلهای مجاور شده با سلولهای مزانشیمیو مایع رویی آنها در همه تیمارها نسبت به گروه شاهد به ترتیب افزایشو کاهش معنی داری را نشان داد. بررسیهای انجام شده حاکی از آن است که ویتامین D3 منجر به افزایش قابلیت سلولهای بنیادی مزانشیمیو مایع رویی آنها در حفظ بقا سلولهای نوتروفیل میگردد (05/0p<).در مجموع به نظر میرسد که تیمار سلولهای بنیادی
فرم در حال بارگذاری ...
[دوشنبه 1399-10-01] [ 12:49:00 ق.ظ ]
|