فهرست مطالب

عنوان                                                                                                                        صفحه

چکیده…………………………………………………………………………………………………………………………. 1

فصل اول – مقدمه

1-1- بیان مسأله…………………………………………………………………………………………………………….. 2

1-2- ضرورت انجام تحقیق………………………………………………………………………………………………. 3

1-3-اهداف پژوهش………………………………………………………………………………………………………… 4

1-4-فرضیه‏ها……………………………………………………………………………………………………………….. 4

1-5-تعریف متغیرها………………………………………………………………………………………………………… 4

فصل دوم – مروری بر تحقیقات انجام شده

2-1- تاریخچه جنس اسینتوباکتر بومانی………………………………………………………………………………… 6

2-2- تاکسونومی رایج اسینتوباکتر بومانی………………………………………………………………………………. 7

2-3- شناسایی گونه های اسینتوباکتر……………………………………………………………………………………. 7

2-4- جایگاه طبیعی اسینتوباکتر بومانی………………………………………………………………………………….. 8

2-5.فاکتورهای بیماری زایی اسینتوباکتر………………………………………………………………………………… 8

2-6.منشا کلینیکی عفونت های اسینتوباکتر بومانی…………………………………………………………………… 10

2-6-1.مننژیت…………………………………………………………………………………………………………….. 10

2-6-2.عفونت خون………………………………………………………………………………………………………. 10

2-6-3.عفونت های دستگاه ادراری…………………………………………………………………………………….. 10

2-6-4. پنومونی بیمارستانی…………………………………………………………………………………………….. 10

2-7. عفونت های بیمارستانی……………………………………………………………………………………………. 11

2-8. استراتژی های درمانی عفونت های اسینتوباکتر بومانی…………………………………………………………. 12

2-9. داروهای ضد میکروبی رایج………………………………………………………………………………………. 12

2-9-1. پلی میکسین ها………………………………………………………………………………………………….. 13

2-9-2.آمینوگلیکوزیدها…………………………………………………………………………………………………. 13

2-9-3.سولباکتام…………………………………………………………………………………………………………. 14

2-9-4. کینولون ها……………………………………………………………………………………………………….. 14

2-9-5.تتراسایکلین ها و تایگلیسین ها………………………………………………………………………………… 15

2-9-6.آنتی بیوتیک های بتالاکتام……………………………………………………………………………………… 15

2-9-6-1.پنی سیلین ها…………………………………………………………………………………………………. 15

2-9-6-2.کارباپنم ها……………………………………………………………………………………………………. 17

2-9-6-3.سفالوسپورین ها……………………………………………………………………………………………… 17

2-9-6-4. مونوباکتام ها………………………………………………………………………………………………… 18

2-9-7.دیگر درمان های ترکیبی………………………………………………………………………………………… 18

2-10.مکانیسم عمل آنتی بیوتیک های بتالاکتام………………………………………………………………………. 18

2-10-1.پنی سیلین ها…………………………………………………………………………………………………… 18

2-10-2.کارباپنم ها……………………………………………………………………………………………………… 19

2-10-3.سفالوسپورین ها……………………………………………………………………………………………….. 19

2-11.مکانیسم های مقاومت…………………………………………………………………………………………….. 20

2-11-1.مکانیسم های مقاومت آنتی بیوتیکی………………………………………………………………………… 20

2-11-2.مکانیسم های مقاومت به بتالاکتام ها………………………………………………………………………… 21

2-11-2-1. مکانیسم های آنزیمی……………………………………………………………………………………… 21

2-11-2-2.مکانیسم های غیر آنزیمی…………………………………………………………………………………. 21

2-12.طبقه بندی بتالاکتامازها…………………………………………………………………………………………… 22

2-13.بتالاکتامازهای باکتری های گرم منفی…………………………………………………………………………… 24

2-14.بتالاکتامازهای باکتری های گرم مثبت………………………………………………………………………….. 24

2-15.بتالاکتامازهای وسیع الطیف……………………………………………………………………………………… 24

2-16.خصوصیات آنتی بیوتیک های وسیع الطیف……………………………………………………………………. 25

2-17.حساسیت ESBL ها در مقابل آنتی بیوتیک ها………………………………………………………………… 25

2-18.انواعESBL  ها……………………………………………………………………………………………………. 26

2-18-1.بتالاکتامازهای تیپ SHV……………………………………………………………………………………. 26

2-18-2.بتالاکتامازهای تیپ TEM…………………………………………………………………………………… 26

2-18-3.بتالاکتامازهای تیپ OXA…………………………………………………………………………………… 27

2–18-4.بتالاکتامازهای تیپCTX-M……………………………………………………………………………… 27

2-18-5. بتالاکتامازهای تیپ NDM(متالوبتالاکتاماز)……………………………………………………………… 27

2-18-6.بتالاکتامازهای تیپ VIM(متالوبتالاکتاماز)……………………………………………………………….. 28

2-19. فاکتور هایی که بر بیان بتالاکتامازها اثر می گذارند………………………………………………………….. 28

2-20.درمان عفونت های ایجاد شده توسط سویه های مولد ESBL……………………………………………… 29

2-21.کنترل……………………………………………………………………………………………………………….. 30

2-22.مثال هایی از مکانیسم های مقاومت به بتالاکتام ها……………………………………………………………. 30

2-22-1.مکانیسم مقاومت به کارباپنم ها……………………………………………………………………………… 30

2-22-2.مکانیسم مقاومت به پنی سیلین ها…………………………………………………………………………… 31

2-22-3.مکانیسم مقاومت به مونوباکتام ها…………………………………………………………………………… 32

2-22-4.مقاومت به آمینوگلیکوزیدها………………………………………………………………………………….. 32

2-22-5. مقاومت به پلی میکسین ها…………………………………………………………………………………… 33

2-22-6.مقاومت به کینولون ها…………………………………………………………………………………………. 33

2-22-7.مقاومت به تتراسایکلین ها و تایگلسین ها………………………………………………………………….. 33

2-23.مهارکنندگان بتالاکتامازها………………………………………………………………………………………… 34

2-23-1.مکانیسم عمل مهارکنندگان بتالاکتامازها……………………………………………………………………. 34

2-24.روش های شناسایی آنزیم های ESBL……………………………………………………………………….. 35

 

 

2-24-1-1.آزمایش مجاورت دو دیسک……………………………………………………………………………… 35

2-24-1-2.ترکیب دو دیسک…………………………………………………………………………………………… 36

2-24-1-3.آزمایش سه بعدی………………………………………………………………………………………….. 36

2-25.شیوع بیمارستانی و ارزیابی میزان کنترل……………………………………………………………………….. 36

2-26.اپیدمیولوژی جهانی اسینتوباکتر بومانی…………………………………………………………………………. 37

2-27. روش مولکولی دخیل در بررسی باکتری های مولد آنزیم های بتالاکتاماز وسیع الطیف………………… 38

2-27-1. واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR)………………………………………………………………………. 39

2-28.سوابق و پیشینه تحقیق……………………………………………………………………………………………. 41

 

فصل سوم – مواد و روش‏ها

3-1-وسایل موردنیاز…………………………………………………………………………………………………….. 37

3-2-مواد موردنیاز……………………………………………………………………………………………………….. 38

3-3-طریقه ساخت محیط های کشت………………………………………………………………………………….. 40

3-3-1.طرز تهیه محیط بلاد آگار(محیط پایه شرکت Merck )………………………………………………….. 40

3-3-2. طرز تهیه محیط نوترینت آگار (شرکت Merck)…………………………………………………………. 40

3-3-3. طرز تهیه محیط SIM(شرکت Merck )………………………………………………………………….. 41

3-3-4. طرز تهیه محیط مک کانکی آگار(شرکت Merck )……………………………………………………… 41

3-3-5. طرز تهیه محیط اوره براث(شرکت Merck )……………………………………………………………… 42

3-3-6. طرز تهیه محیط مولر هینتون آگار(شرکت Merck ):…………………………………………………………. 42

3-3-7. طرز تهیه محیط MRVP(شرکت Merck )………………………………………………………………….. 52

3-3-8. طرز تهیه محیط BHI براث(شرکت Merck)……………………………………………………………. 52

3-3-9. طرز تهیه محیط TSI(شرکت Merck ):………………………………………………………………….. 53

3-3-10. طرز تهیه محیط سیمون سیترات (شرکت Merck )……………………………………………………. 54

3-3-11. طرز تهیه محیط OF(شرکت Merck ):…………………………………………………………………………………….. 54

3-4. روش انجام این پژوهش…………………………………………………………………………………………… 55

3-4-1.جمع آوری نمونه………………………………………………………………………………………………… 55

3-4-2.جداسازی باکتری ها…………………………………………………………………………………………….. 55

3-4-3. نگه داری باکتری ها در 80- درجه سلسیوس………………………………………………………………. 57

3-5.آنتی بیوگرام………………………………………………………………………………………………………….. 57

3-5-1-تهیه سوسپانسیون باکتریایی…………………………………………………………………………………………. 57

3-5-2-روش آنتی بیوگرام……………………………………………………………………………………………… 58

3-6.استخراج ژنوم به روش جوشاندن…………………………………………………………………………………. 59

3-7. اندازه گیری غلظت DNA ژنومیک تخلیص شده……………………………………………………………… 59

3-8. الکتروفورز محصول استخراج ژنوم………………………………………………………………………………. 59

3-9.مواد و وسایل مورد نیاز برای اجرای PCR……………………………………………………………………… 59

3-9-1.DNA الگو………………………………………………………………………………………………………. 59

3-9-2.Master Mix…………………………………………………………………………………………………. 60

3-9-3.پرایمر……………………………………………………………………………………………………………… 60

3-9-4.محلول کار پرایمر PCR……………………………………………………………………………………….. 61

3-10.روش اجرا PCR………………………………………………………………………………………………….. 61

3-11.مواد و وسایل مورد نیاز برای اجرای الکتروفورز………………………………………………………………. 63

3-11-1.بافرTBE 5X………………………………………………………………………………………………….. 63

3-11-2.بافر TBE 1X…………………………………………………………………………………………………. 63

3-11-3.ژل آگارز 5/1 درصد…………………………………………………………………………………………. 63

3-12.روش انجام الکتروفورز…………………………………………………………………………………………… 64

3-13.تعیین توالی…………………………………………………………………………………………………………. 64

فصل چهارم – نتایج و بحث

4-1.جداسازی، کشت، تشخیص نمونه های باکتری………………………………………………………………….. 65

4-1-1. درصدو تعداد گونه های مختلف موجود در نمونه های جدا شده از بیماران…………………………….. 65

4-1-2. نتایج تست های افتراقی برای گونه های اسینتوباکتر بومانی……………………………………………….. 67

4-1-3. تعیین حساسیت آنتی بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن…………………………………………………… 67

4-1-3-1.نتایج حاصل از روش دیسک دیفیوژن برای تمام ایزوله های اسینتوباکتر بومانی…………………….. 67

4-1-3-2. تهیه الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی………………………………………………………………………… 69

4-2.استخراج DNA……………………………………………………………………………………………………… 72

4-3.نتایج بدست آمده در بررسی ژن کد کننده آنزیمblaVIM…………………………………………………… 73

4-4.نتایج بدست آمده در بررسی ژن کدکننده آنزیم blaNDM………………………………………………….. 74

4-5:.بحث………………………………………………………………………………………………………………….. 76

 

فصل پنجم – نتیجه‏گیری

5-1- نتیجه‏گیری………………………………………………………………………………………………………….. 80

5-2-پیشنهادات…………………………………………………………………………………………………………… 82

منابع…………………………………………………………………………………………………………………………. 83

چکیده انگلیسی……………………………………………………………………………………………………………. 94

 

فهرست جدول‏ها

عنوان                                                                                                                        صفحه

جدول2-1:طبقه بندی بتالاکتامازها در باکتری های گرم منفی………………………………………………………………………….. 23

جدول شماره 3-1: ترکیبات پایه ی محیط بلاد آگار………………………………………………………………………………………… 49

جدول شماره 3-2: ترکیبات محیط نوترینت آگار…………………………………………………………………………………………….. 49

جدول شماره 3-3: ترکیبات محیط SIM……………………………………………………………………………… 50

جدول شماره 3-4: ترکیبات محیط مک کانکی آگار…………………………………………………………………. 50

جدول شماره 3-5: ترکیبات محیط اوره براث………………………………………………………………………… 51

جدول شماره 3-6: ترکیبات محیط مولر هینتون آگار………………………………………………………………… 51

جدول شماره 3-7: ترکیبات محیط MRVP………………………………………………………………………….. 52

جدول شماره 3-8: ترکیبات محیط BHI براث……………………………………………………………………….. 52

جدول جدول شماره 3-9: ترکیبات محیط TSI……………………………………………………………………….. 53

جدول جدول شماره 3-10: ترکیبات محیط سیمون سیترات……………………………………………………….. 54

جدول شماره 3-11: ترکیبات محیط OF……………………………………………………………………………… 55

جدول شماره 3-12:خلاصه نتایج حاصل از محیطOF………………………………………………………………. 56

جدول شماره3-13:توالی پرایمرهای مورد استفاده در این مطالعه………………………………………………….. 60

جدول شماره 3-14: محلول کاری پرایمر…………………………………………………………………………….. 61

جدول شماره3-15: ترکیب واکنش PCR برای هر نمونه…………………………………………………………….. 62

جدول شماره3-16: برنامه انجام واکنش PCR برای ژن VIM……………………………………………………… 62

جدول شماره 3-17 برنامه انجام واکنش PCR برای ژن NDM……………………………………………………. 62

جدول شماره3-18: طرز تهیه بافر TBE 5X…………………………………………………………………………… 63

جدول شماره 4-1 : فراوانی اسینتوباکتر بومانی در نمونه کلینیکی مورد بررسی………………………………….. 66

جدول شماره 4-2: خصوصیات بیو شیمیایی اسینتوباکتر بومانی……………………………………………………. 67

جدول شماره 4-3: نتایج حساسیت اسینتوباکتر بومانی به دیسک های آنتی بیوتیکی در نمونه های کلینیکی مورد بررسی       68

جدول شماره 4-4 : الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی در اسینتوباکتر بومانی………………………………………….. 70

 

فهرست نمودارها

عنوان                                                                                                                        صفحه

نمودار شماره 4-1: فراوانی سویه های اسینتوباکتر در نمونه های کلینیکی مورد بررسی………………………… 66

نمودار شماره 4-2 : درصد مقاومت مشاهده شده در بین ایزوله های جدا شده از بیماران………………………. 69

نمودار شماره4-3: درصد فراوانی ژن های VIM,NDMمورد مطالعه در اسینتوباکتر بومانی های ایزوله شده از بیماران        75

 

فهرست شکل‏ها

عنوان                                                                                                                        صفحه

شکل 4-1: بررسی کیفی .الکتروفورز نمونه‌های DNA  استخراج شده با روش جوشاندن بر روی ژل آگارز 1 72

شکل 4-2: بررسی کمی. نتایج اندازه گیری غلظت DNA استخراجی با روش جوشاندن با دستگاه نانودراپ در طول موج 260 نانومتر……….72

شکل شماره 4-3: الکتروفورز ژل آگارز محصول آمپلی فایل شده ی ژن blaVIM در سویه های اسینتوباکتر بومانی با PCR            73

شکل شماره 4-4 :الکتروفورز ژل آگارز محصول آمپلی فای شده ی ژن blaNDM در سویه های اسینتوباکتر بومانی با PCR    

چکیده:

مقدمه : در حال حاضر بتالاکتام ها به عنوان داروی انتخابی در درمان عفونت های اسینتوباکتر بومانی مقاوم به چند دارو استفاده می گردد هرچند مقاومت به این عوامل رو به افزایش می باشد. این باکتری با مکانیسم های مختلف از جمله تولید بتالاکتامازها به این داروها مقاومت نشان می دهند. متالوبتالاکتاماز دارای تیپ های مختلفی می باشند که که در بین آنها blaVIM و  blaNDMاز همه بارزتر است .با توجه به اینکه در شهر تهران میزان فراوانی ژن فوق در اسینتوباکتر بومانی مشخص نمی باشد این مطالعه با هدف بررسی مقاومت دارویی و فراوانی ژنهای هایblaVIM و blaNDM در اسینتوباکتر بومانی های ایزوله شده از بیماران شهر تهران به روش مولکولی اجرا گردید.

روش کار: این مطالعه برروی 500 نمونه بالینی جمع آوری شده از 3 بیمارستان شهر تهران طی مدت دو سال انجام گردید. پس از جمع آوری نمونه ها با بهره گرفتن از روش های کشت و بیوشیمیایی گونه اسینتوباکتر بومانی شناسائی گردید. سپس تست حساسیت آنتی بیوتیکی بر روی این  ایزوله ها با روش دیسک دیفیوژن بر اساس دستور CLSI انجام گردید. در نهایت برای بررسی فراوانی ژن های blaVIM و blaNDM با بهره گرفتن از پرایمرهای اختصاصی PCR انجام شد.

نتایج:  با توجه به نتایج غربالگری اولیه، بیشترین مقاومت آنتی بیوتیکی در 100 ایزوله اسینتوباکتر بومانی مربوط به آنتی بیوتیک های سفی پیم و کمترین مقاومت مربوط به پلی میکسین B بدست آمد. نتایج PCR نشان داد که به ترتیب 17% و 20%، سویه ها حامل ژن های blaVIM و  blaNDMمی باشند.

بحث:  این مطالعه نشان  داد که ژنهای کدکننده blaVIM و blaNDMدر حال گسترش در بین سویه های بالینی اسینتوباکتر بومانی بوده، لذا شناسایی ژنهای فوق با بهره گرفتن از روش مولکولیPCR که روشی سریع و مقرون به صرفه است برای جلوگیری از انتشار عفونت در بیمارستان های شهر تهران پیشنهاد می شود.

کلمات کلیدی: اسینتوباکتر بومانی، بتالاکتامازهای وسیع الطیف، دیسک ترکیبی، VIM، NDM، PCR

فصل اول  

مقدمه

1-1-بیان مسئله

اسینتوباکتربومانی از پاتوژن های فرصت طلب در حال گسترش بوده، این باکتری یک باسیل گرم منفی، غیر متحرک، غیر تخمیری، پلی مورف، هوازی اجباری و معمولا کپسول دار است که بر روی محیط های معمولی آزمایشگاهی به

فهرست مطالب

عنوان……………………………………… صفحه

کلیات تحقیق………………………… 1

1-1)مقدمه…………………………………. 2

1-2)بیان مساله…………………………….. 3

1-3)اهمیت و ضرورت تحقیق…………………….. 5

1-4)اهداف تحقیق……………………………. 5

1-5)چارچوب نظری تحقیق ………………………. 6

1-6)مدل نظری تحقیق…………………………. 7

1-7)پرسشهای تحقیق………………………….. 7

1-8)فرضیه های تحقیق………………………… 8

1-9)تعریف نظری متغیرهای تحقیق……………….. 8

1-9-1) شفافیت اهداف برند……………………. 8

1-9-2)سختی تحقق اهداف برند………………….. 9

1-9-3)برند سازی داخلی………………………. 9

1-9-4)عملکرد برند در سطح کار کنان……………. 10

1-9-5)تعهد کاركنان به برند………………….. 10

1-9-6)وفاداری کارکنان به برند……………….. 11

1-9-2) تعاریف عملیاتی متغیرها ………………. 11

1-9-2-1) شفافیت اهداف برند………………….. 11

1-9-2-2) سختی تحقق اهداف برند……………….. 11

1-9-2-3) برند سازی داخلی……………………. 11

1-9-2-4) عملكرد برند در سطح كاركنان………….. 11

1-9-2-5) تعهد كاركنان به برند……………….. 12

1-9-2-6) وفاداری كاركنان به برند…………….. 12

1-10) قلمرو تحقیق………………………….. 12

1-10-1) قلمرو موضوعی ………………………. 12

1-10-2) قلمرو مكانی………………………… 12

1-10-3) قلمرو زمانی………………………… 12

…………………….. 13

2-1)بخش اول:نام تجاری (برند) ………………… 14

2-1-1)مقدمهَ……………………………….. 14

2-1-2)تاریخچه برند…………………………. 15

2-1-3)ویژگی های یک برند مناسب……………….. 18

2-1-4)قدرت و ارزش برند……………………… 19

2-1-5)برند سازی……………………………. 20

2-1-5-1-) برندسازی خارجی……………………. 20

2-1-5-2) برندسازی داخلی…………………….. 20

2-1-6)عملکرد برند و معیار سنجش آن……………. 21

2-1-7)عملکرد برند در سطح کار کنان……………. 22

2-1-8)حس تعلق کارکنان به برند……………….. 22

2-1-9)تعهد کارکنان به برند………………….. 23

2-1-10)وفاداری کارکنان به برند………………. 23

2-2)بخش دوم:عملکرد کارکنان………………….. 24

2-2-1)مقدمه……………………………….. 24

2-2-2)تعریف ارزیابی عملکرد………………….. 25

2-2-3)تاریخچه ارزیابی عملکرد………………… 26

2-2-4)ضرورت و اهمیت ارزیابی عملکرد…………… 27

2-2-5)هدف ارزیابی عملکرد……………………. 28

2-2-5-1) اهداف ارزیابی عملكرد از نظر كلین ……. 28

2-2-5-2) اهداف ارزیابی عملكرد از نظر مك گرگور…. 29

2-2-5-3) اهداف ارزیابی عملكرد از نظر ابیدا……. 29

2-2-6)کاربرد های ارزیابی عملکرد……………… 30

2-2-7)مراحل ارزیابی………………………… 32

2-2-8)منابع ارزیابی عملکرد………………….. 35

2-2-9)روش های ارزیابی……………………….. 36

2-2-9-1) روش های مقیاسی…………………….. 37

2-2-9-2) روش عامل سنجی……………………… 38

2-2-9-3) روش ثبت وقایع حساس…………………. 38

 

2-2-9-4) روش توصیفی………………………… 38

2-2-9-5) روش قیاسی…………………………. 39

2-2-9-6) روش درجه بندی……………………… 39

2-2-9-7) روش توزیع اجباری…………………… 40

2-2-9-8) روش انتخاب اجبرای………………….. 40

2-2-9-9) روش مقیاسی رفتاری………………….. 40

2-2-10)پیشینه تحقیق………………………… 41

2-2-10-1) منابع داخلی………………………. 41

2-2-10-2) منابع لاتین……………………….. 43

………… 46

3-1) مقدمه………………………………… 47

3- 2)قلمرو مکانی  تحقیق…………………….. 47

3- 3) روش تحقیق……………………………. 47

3-4) جامعه و نمونه آماری……………………. 47

3-4-1)جامعه آماری………………………….. 47

3-4-2)حجم نمونه……………………………. 48

3-4-3)روش نمونه گیری……………………….. 48

3-5) متغیرهای تحقیق………………………… 49

3-6)تر تیب سوالات مربوط به متغیرهای تحقیق……… 49

3-7) روش گردآوری داده ها…………………….. 50

3-7-1) شیوۀ کتابخانه ای و اسنادی…………….. 50

3-7-2) شیوۀ میدانی…………………………. 50

3-8) روائی و پایائی ابزار اندازه گیری. ……….. 51

3-8-1) روائی (اعتبار) ابزار اندازه گیری………. 51

3-8-2) پایائی (اعتماد) ابزار اندازه گیری……… 51

3-9) روش تجزیه و تحلیل داده ها………………. 52

. 53

4-1) مقدمه………………………………… 54

4-2-1) توصیف پاسخ دهندگان…………………… 54

4-2-2)شاخص های توصیفی برای متغیر های اصلی تحقیق.. 57

4-3) بررسی مدل تحقیق……………………….. 59

4-4-1)مدل  پایه تحقیق درحالت استاندارد……….. 59

4-4-2)مدل پایه تحقیق درحالت اعداد معنی داری…… 60

4-4-3)بررسی شاخص های معنی داری وبرازش مدل…….. 61

4-4-4) بررسی مسیرهای غیر مستقیم……………… 62

4-4-5)آزمون فرضیه های تحقیق…………………. 62

………….. 65

5-1) مقدمه………………………………… 66

5-2) نتیجه گیری تحقیق………………………. 66

5-2-1)آمار توصیفی………………………….. 66

5-2-2)نتایج آماری استنباطی………………….. 67

5-3)پیشنهادات بر اساس یافته های تحقیق………… 69

5-4) محدودیت های تحقیق …………………….. 70

5-5)پیشنهادات برای تحقیقات آتی………………. 71

منابع داخلی……………………………….. 73

منابع لاتین………………………………… 76

پیوست ها………………………………….. 78

 

 

فهرست جداول

جدول 2-1)خلاصه ی پیشینه های مرتبط (صفحه 45)

جدول 3-1) ضرایب آلفای کرونباخ  برای متغیر ها ی تحقیق 52

جدول4-1) توصیف میزان  جنسیت پاسخ دهندگان……… 54

جدول4-2) توصیف تحصیلات پاسخ دهندگان…………… 55

جدول4-3) توصیف سن پاسخ دهندگان………………. 56

جدول 4-4)شاخص های توصیفی برای متغیرهای اصلی…… 57

جدول 4- 5) شاخص های معنی داری و برازش مدل…….. 61

جدول 4-6 )مسیرهای غیر مستقیم منتهی به عملکرد….. 62

 

 

 

 

 

 

 

فهرست نمودارها

نمودار4-1) نمودار میله ای  جنسیت پاسخ دهندگان…. 55

نمودار4-2) نمودار میله ای  تحصیلات پاسخ دهندگان… 56

نمودار4-3) نمودار میله ای  سن پاسخ دهندگان……. 57

نمودار4-4) نمودار میله ای  مقایسه میانگین های متغیر های  تحقیق…………………………………………. 58

نمودار 4- 5) مدل پایه تحقیق درحالت استاندارد….. 59

نمودار 4- 6) مدل پایه تحقیق درحالت اعداد معنی داری.. 60

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فهرست اشکال

شکل 1-1)مدل نظری تحقیق……………………… 7

شکل2-1)اطلاعات معتبر ارزیابی عملکرد. ………….. 30

شکل 2-2)مراحل ارزیابی عملکرد………………… 34

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فهرست مطالب

عنوان                                     صفحه

چکیده. 1

فصل اول:کلیات تحقیق. 2

1-1 مقدمه:. 3

1-2بیان مسأله:. 4

1-3ضرورت و اهمیت تحقیق:. 6

1-4 اهداف تحقیق:. 6

1-5 مدل مفهومی تحقیق. 7

1-6 فرضیه ها:. 7

1-7 تبیین و تعریف عملیاتی متغیرهای تحقیق:. 8

1-7-1 متغیرهای مستقل:. 8

1-7-2 متغیر وابسته:. 11

1-8 قلمروتحقیق:. 12

1-8-1 قلمرو موضوعی:. 12

1-8-2 قلمرو مکانی:. 12

1-8-3 قلمرو زمانی:. 12

فصل دوم :مبانی نظری تحقیق. 13

2-1 مقدمه:. 14

2-2بازاریابی:. 14

2-3مدیریت بازاریابی:. 14

2-4 بازاریابی خدمات:. 15

2-4-1ویژگی های انحصاری خدمات:. 15

2-5 اینترنت:. 16

2-6 تجارت الکترونیک. 17

2-6-1 مفهوم تجارت الکترونیک:. 17

2-6-2 تاریخچه تجارت الکترونیکی:. 18

2-6-3 مزایای ایجاد تجارت الکترونیکی. 23

2-6-4 معایب تجارت الکترونیکی. 25

2-7 زیر ساختهای لازم برای گسترش تجارت الکترونیکی در ایران:  26

2-8 تعریف بانک:. 27

2-9 چگونگی پیدایش بانکداری در ایران:. 28

2-10 تعاریف و مفاهیم بانکداری الکترونیک:. 34

2-10-1 مزایای بانکداری الکترونیکی. 35

2-10-1-1 مزایای بانکداری الکترونیک از دیدگاه بانک ها. 36

2-10-2 بانکداری الکترونیکی در ایران. 37

2-10-3 تحولات بانکداری الکترونیکی. 38

2-10-4 ضرورت بانکداری الکتریکی:. 39

2-10-7 زیر ساخت های مورد نیاز  بانکداری الکترونیکی. 41

2-10-8 انواع کانال های ارائه خدمات الکترونیکی:. 44

2-10-9 سطوح بانکداری الکترونیک:. 48

2-10-11 امنیت در بانکداری الکترونیکی:. 49

2-11 معماری WAP:. 50

2-12 اجزای بانکداری الکترونیکی در ایران:. 51

2-12-1 انواع کارت ها. 51

2-12-2 شبکه شتاب:. 51

2-12-3سیستم تسویه بین بانکی مبادلات ارزی:. 51

2-12-4 شبکه سوئیچ عملیاتی خرد بانکی و بین بانکی:. 52

2-12-4-1 شبکه مرکزی سوئیفت. 52

2-13 شکل گیری شبکه شتاب از آغاز تا امروز:. 52

2-14سوئیفت (SWIFT). 53

2-14-1 تعریف سوئیفت. 53

2-14-2 مزایا و اهمیت سوئیفت (SWIFT). 53

2-14-3 کاربرد و کاربران سوئیفت. 55

2-14-4 ساز و کار عمل سوئیفت. 57

2-15 تجارب بین المللی برخی از کشورها در بانکداری الکترونیک  58

2-16 نقش مشتری در نظام بانکی:. 62

2-16-1 اهمیت مشتری:. 62

2-16-2 رضایت مشتری:. 63

 

2-17تشریح مفهوم وفاداری. 64

2-17-1 انواع وفاداری. 65

2-17-2مزایای وفاداری مشتریان. 66

2-17-3 عوامل مؤثر بر وفاداری:. 67

2-17-4 وفاداری یک فرد به یک بانک:. 69

2-18 تاریخچه بانک پارسیان. 69

2-18-1 اهداف بانک:. 69

2-18-2 سرمایه بانک:. 70

2-18-3 معاونین بانک:. 70

2-18-4 شرکت های وابسته به بانک:. 70

2-18-5 لوگو بانک پارسیان:. 71

2-18-6 مدیر عامل بانک :. 72

2-18-7 نمودار سازمانی بانک پارسیان. 73

2-19 چشم انداز آتی بانکداری الکترونیکی:. 73

تحقیقات داخلی:. 74

تحقیقات خارجی:. 76

فصل سوم: روش اجرای تحقیق. 78

3-1 مقدمه:. 79

3-2 روش تحقیق:. 79

3-3 جامعه آماری:. 80

3-4 روش نمونه گیری:. 80

3-5 روش ها و ابزار جمع آوری اطلاعات:. 80

3-6 روایی:. 81

3-7 پایایی:. 82

3-8 روش تجزیه و تحلیل اطلاعات:. 83

3-8-1 آمار توصیفی:. 84

فصل چهارم :تجزیه و تحلیل داده ها. 85

4-1- مقدمه. 86

4-2- آمار توصیفی. 86

4-2-1- توصیف متغیرهای جمعیت شناختی پاسخ دهندگان: توصیف جنسیت پاسخ دهندگان. 86

4-2-2 توصیف میزان تحصیلات. 87

4-2-3 توصیف سن. 88

4-2-4 در كدام سطح فعالیت شغلی دارید؟. 89

4-2-5 ارتباط بین جنسیت و وفاداری. 90

4-2-6 ارتباط بین تحصیلات و وفاداری. 91

4-2-7 توصیف متغیر کیفیت خدمات. 92

4-2-8  توصیف متغیر ارزش های دریافت شده. 93

4-2-9 توصیف متغیر اعتماد. 94

4-2-10 توصیف متغیر عادت. 95

4-2-11 توصیف متغیر اعتبار. 96

4-2-12 توصیف متغیر وفاداری مشتری. 97

4-3- بررسی نرمال بودن متغیرها. 98

4-4 آمار استنباطی. 99

فصل پنجم : نتیجه گیری و پیشنهادات. 105

5-1 مقدمه. 106

5-2 نتایج داده های آمار توصیفی:. 106

5-3 نتایج داده های آمار استنباطی:. 107

5-5 پیشنهادات براساس یافته های تحقیق:. 108

5-6 محدودیت های تحقیق:. 109

5-7 پیشنهادات برای تحقیقات آینده:. 109

منابع. 110

پیوست ها. 117

 

 

 

 

 

 

فهرست  جداول

عنوان                                                                                           صفحه

جدول 2-1) مقایسه بانکداری سنتی با بانکداری الکترونیکی. 39

جدول 3-1 )جدول مربوط به تعداد سوالات هر متغیر پرسشنامه. 81

جدول 3-2 )میزان آلفای کرنباخ پرسشنامه. 83

جدول 4- 1) توصیف متغیر جنسیت. 86

جدول4- 2) توصیف میزان تحصیلات. 87

جدول 4- 3) توصیف سن. 88

جدول4- 4) در كدام سطح فعالیت شغلی دارید؟. 89

جدول4_5)آماره توصیفی مربوط به گروه زن و مرد. 91

جدول4_6) تحلیل واریانس برای مقایسه ی وفاداری و سطح تحصیلات  91

جدول 4- 7) توصیف متغیر کیفیت خدمات. 92

جدول4- 8) توصیف متغیر ارزش های دریافت شده. 93

جدول 4- 9) توصیف متغیر اعتماد. 94

جدول 4- 10) توصیف متغیر عادت. 95

جدول 4- 11) توصیف متغیر اعتبار. 96

جدول 4-13) نتایج آزمون کولموگراف – اسمیرنوف. 98

جدول 4-14) ضریب همبستگی کیفیت خدمات الکترونیکی در وب سایت ها و وفاداری مشتریان. 99

جدول 4-15) ضریب همبستگی ارزش درک شده در وب سایت‌ها و وفاداری مشتریان. 100

جدول 4-16) ضریب همبستگی اعتماد در وب سایت ها و وفاداری مشتریان  101

جدول4 -17) ضریب همبستگی عادت در وب سایت‌ها و وفاداری مشتریان  102

جدول 4-18) ضریب همبستگی شهرت در وب سایت‌ها و وفاداری مشتریان  103

جدول 4-19) میزان آلفای کرونباخ پرسشنامه. 104

فهرست نمودارها

عنوان                                                                                          صفحه

نمودار 1-1)مدل مفهومی. 7

نمودار 4- 1) نمودار دایره ای جنسیت. 87

نمودار 4-2) نمودار میله ای میزان تحصیلات. 88

نمودار  4-3) نمودار میله ای سن. 89

نمودار 4-4) در كدام سطح فعالیت شغلی دارید؟. 90

نمودار 4-7) نمودار هیستوگرام کیفیت خدمات. 92

نمودار 4-8) نمودار متغیر ارزش های دریافت شده. 93

نمودار  4-9) نمودار هیستوگرام اعتماد. 94

نمودار 4-10) نمودار هیستوگرام عادت. 95

نمودار 4-11) نمودار هیستوگرام اعتبار. 96

نمودار4-12) نمودار هیستوگرام مشتری. 97

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                          صفحه

فصل اول- مقدمه……………………………………………………………………………………………………………………………………….1

1-1- روش های كمك باروری………………………………………………………………………………………………………………….2

1-2- ناباروری……………………………………………………………………………………………………………………………………………5

1-3- تولید اسپرم …………………………………………………………………………………………………………………………………….5

1-4- مایع انزالی………………………………………………………………………………………………………………………………………..6

1-4-1- آنالیز مایع انزالی………………………………………………………………………………………………………………………….7

1-5- پارامترهای اسپرم………………………………………………………………………………………………………………………….10

1-5-1- مورفولوژی…………………………………………………………………………………………………………………………………10

1-5-2- تحرک اسپرم…………………………………………………………………………………………………………………………….12

1-5-3- درجه بندی تحرک اسپرم ……………………………………………………………………………………………………….14

1-5-4- قابلیت حیات اسپرم………………………………………………………………………………………………………………….14

1-5-5- حجم………………………………………………………………………………………………………………………………………….15

1-5-6- غلظت………………………………………………………………………………………………………………………………………..16

1-6- انواع مرگ سلولی و تعریف آن………………………………………………………………………………………………………18

1-6-1- نکروز…………………………………………………………………………………………………………………………………………18

1-6-2- آپوپتوز سلولی…………………………………………………………………………………………………………………………..18

1-6-2-1 مراحل آپوپتوز ……………………………………………………………………………………………………………………….19

1-6-2-2 مسیر های آپوپتوز………………………………………………………………………………………………………………….21

1-6-2-3- عناصر کلیدی مسیرهای آپوپتوز………………………………………………………………………………………….21

1-6-2-4- روش های بررسی آپوپتوز …………………………………………………………………………………………………..23

1-6-2-4-1-  بررسی تغییرات غشاء پلاسمایی در مرگ سول ……………………………………………………………23

1-6-2-4-1-1- تعیین فسفاتیدیل سرین سطح بیرونی غشاء سلول……………………………………………………24

1-6-2-4-2-  بررسی سیتوتوکسیسیتی ………………………………………………………………………………………………24

1-6-2-4-3-  بررسی تغییرات مورفولوژی …………………………………………………………………………………………..25

1-6-2-4-3-1-  استفاده از میکروسکوپ الکترونی………………………………………………………………………………25

1-6-2-4-3-2-  استفاده از میکروسکوپ نوری وفلورسانس………………………………………………………………..25

1-7-  منشاء آسیب DNA اسپرم…………………………………………………………………………………………………………26

1-7-1-  بسته بندی غیرطبیعی كروماتین……………………………………………………………………………………………27

1-8-  ساختار کروماتین اسپرم و تأثیر آن بر ناباروری …………………………………………………………………………28

1-8-1-  بررسی ساختار کروماتین اسپرم……………………………………………………………………………………………..28

1-9-  نقش آپوپتوز در آسیب DNA اسپرم………………………………………………………………………………………..29

1-10-  استرس اكسیداتیو به واسطه ROS…………………………………………………………………………………………30

1-11-  تاثیر عوامل محیطی برسلامت DNA  و میزان موفقیت روش های کمک باروری…………………..31

1-11-1-  مصرف سیگار………………………………………………………………………………………………………………………..31

1-11-2-  مواجهات شغلی…………………………………………………………………………………………………………………….32

1-11-3-  داروهای شیمی درمانی و رادیوتراپی……………………………………………………………………………………33

1-11-4-  سن………………………………………………………………………………………………………………………………………..33

1-12-  تكنیك­های بررسی ساختار كروماتین……………………………………………………………………………………….33

1-12-1-  روش­های تعیین آسیب DNA اسپرم انسان………………………………………………………………………34

1-12-1-1- تست TUNEL……………………………………………………………………………………………………………….35

1-12-1-2- روش DBD-FISH………………………………………………………………………………………………………..35

1-12-1-3- روش Comet…………………………………………………………………………………………………………………..36

1-12-1-4- رنگ­آمیزی CMA3…………………………………………………………………………………………………………36

1-12-1-5- تكنیک SCSA………………………………………………………………………………………………………………..37

1-12-1-6- تست  SCD……………………………………………………………………………………………………………………..37

1-12-1-7- رنگ­آمیزی آكریدین اورانژ………………………………………………………………………………………………..39

1-12-1-8- رنگ­­آمیزی تولوئیدین بلو………………………………………………………………………………………………….39

1-13- روش مهاجرت اسپرم………………………………………………………………………………………………………………….39

1-14- روش سانتریفیوژ شیب غلظت…………………………………………………………………………………………………….40

فصل دوم- مواد و روش

 ها………………………………………………………………………………………………………………………41

2-1- مواد و وسایل  مورد نیاز…………………………………………………………………………………………………………………42

2-1-1- وسایل مورد نیاز………………………………………………………………………………………………………………………….42

2-1-2- مواد مورد نیاز……………………………………………………………………………………………………………………………..42

2-2- ساخت محلول های مورد نیاز…………………………………………………………………………………………………………45

2-2-1- ساخت محلول Ham’s F10…………………………………………………………………………………………………….45

2-2-2- محلول های لازم برای تست پراکندگی کروماتین اسپرم (SCD)…………………………………………..46

2-2-3- ساخت محلول تانل……………………………………………………………………………………………………………………..46

2-2-4- ساخت محلول (PBS)……………………………………………………………………………………………………………….46

2-2-5- ساخت رنگ ائوزین-نیگروزین…………………………………………………………………………………………………….47

2-2-6- ساخت رنگ رایت………………………………………………………………………………………………………………………..47

2-3- روشها………………………………………………………………………………………………………………………………………………..48

2-3-1- روش جمع آوری اسپرم…………………………………………………………………………………………………………….. 48

2-3-2- آنالیز مایع انزالی………………………………………………………………………………………………………………………… 48

2-3-2-1- آزمایشات ماکروسکوپی…………………………………………………………………………………………………………..48

2-3-2-1-1-  ظاهر………………………………………………………………………………………………………………………………….48

2-3-2-1-2- آبکی کردن…………………………………………………………………………………………………………………………48

2-3-2-1-3-  حجم………………………………………………………………………………………………………………………………….48

2-3-2-1-4-  چسبندگی…………………………………………………………………………………………………………………………48

2-3-2-2- آزمایشات میکروسکوپی………………………………………………………………………………………………………….49

2-3-2-2-1- آگلوتیناسیون……………………………………………………………………………………………………………………..50

2-3-2-2-2- بررسی تعداد اسپرم…………………………………………………………………………………………………………..50

2-3-2-2-2-1- روش استفاده از MAKLER CHAMBER برای شمارش ………………………………………..50

2-3-2-2-3- ارزیابی تحرک……………………………………………………………………………………………………………………51

2-3-2-2-3-1- روش کار……………………………………………………………………………………………………………………….52

2-3-2-2-4- ارزیابی قابلیت حیات…………………………………………………………………………………………………………53

2-3-2-2-4-1- روش کار رنگ آمیزی ائوزین-نیگروزین………………………………………………………………………53

2-3-2-2-5- ارزیابی مورفولوژی………………………………………………………………………………………………………………54

2-3-2-2-5-1- رنگ آمیزی پاپانیکولا……………………………………………………………………………………………………54

2-3-2-2-5-2- روش فیکس کردن………………………………………………………………………………………………………..54

2-3-2-2-5-3-روش رنگ آمیزی پاپانیکولا……………………………………………………………………………………………55

2-3-3-  Direct swim-up………………………………………………………………………………………………………………………57

2-3-3-1- روش کار………………………………………………………………………………………………………………………………….57

2-3-4- تست بررسی میزان پراکندگی کروماتین اسپرم (SCD)……………………………………………………………58

2-3-4-1- روش کار…………………………………………………………………………………………………………………………………58

2-3-5- روش رنگ آمیزی تانل…………………………………………………………………………………………………………………60

2-3-6- آنالیز آماری………………………………………………………………………………………………………………………………….62

فصل سوم- نتایج………………………………………………………………………………………………………………………………………..63

3-1 نتایج اثر آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی تحرک اسپرم………………………………64

3-2- نتایج اثر آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قابلیت حیات اسپرم………………….67

3-3- نتایج اثر آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی مورفولوژی اسپرم……………………..68

3-4- نتایج اثر آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قطعه قطعه شدن DNA اسپرم………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….70

3-5- نتایج اثر زمان های مختلف انکوباسیون(3،2،1،0ساعت) بعد از  آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قطعه قطعه شدن DNA اسپرم………………………………………………………………………………….72

3-6- نتایج اثر زمان های مختلف انکوباسیون(3،2،1،0ساعت) بعد از  آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی آپوپتوز اسپرم………………………………………………………………………………………………………………75

3-7- رابطه میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم با سایر پارامترهای اسپرم……………………………………78

3-8- رابطه میزان آپوپتوز اسپرم با سایر پارامترهای اسپرم…………………………………………………………………..79

3-9- رابطه میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم با میزان آپوپتوز اسپرم…………………………………………..80

3-10- نتایج کلی……………………………………………………………………………………………………………………………………80

فصل چهارم- بحث………………………………………………………………………………………………………………………………….81

4-1- تا ثیر روش آماده سازی Dricct Swim up بر روی پارامترهای اسپرم………………………………………83

4-2- تاثیر زمان های مختلف انکوباسیون اسپرم در دمای 37 درجه سانتی گراد بر روی قطعه قطعه شدن DNA و آپوپتوز اسپرم…………………………………………………………………………………………………………………..84

4-3- پیشنهادات…………………………………………………………………………………………………………………………………….90

منابع

چکیده انگلیسی

فهرست شکل ها

 1-1- ساختار اسپرم انسانی……………………………………………………………………………………………………………………..9

1-2- ارزیابی آسیب DNA توسط: .. . A.TUNEL, B.COMET, C.CMA337

1-3- تست  SCD………………………………………………………………………………………………………………………………….38

2-1- انواع مختلف آگلوتیناسیون…………………………………………………………………………………………………………..50

2-2- MAKLER CHAMBERبرای شمارش اسپرم استفاده می شود………………………………………………51

2 -3- شکل لامل MAKLER CHAMBER …………………………………………………………………………………….52

2-4- چگونگی قرارگیری لوله فالکون بازاویه 45 درجه در انکوباتور…………………………………………………….57

3-1- رنگ آمیزی ائوزین-نیگروزین برای سنجش میزان زنده یا مرده بودن اسپرم…………………………….67

3-2- رنگ آمیزی پاپانیکولا ………………………………………………………………………………………………………………….69

3-3- تست SCD برای بررسی میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم میباشد……………………………………74

 3-4- رنگ آمیزی TUNEL………………………………………………………………………………………………………………….76

 

فهرست جدول ها

1-1 : خصوصیات میکرسکوپی نمونه انزال طبیعی مطابق با استاندارد های سازمان بهداشت جهانی (2010/WHO)…………………………………………………………………………………………………………………………………….17

2-1- ساخت Ham’sf10……………………………………………………………………………………………………………………..45

2-2- محلول های لازم برای رنگ آمیزی پاپانیکولا………………………………………………………………………………55

3-1-مقایسه پارامترهای اسپرمی قبل و بعد از آماده سازی اسپرم ……………………………………………………..71

3-2-مقایسه میانگین اثر زمان های مختلف انکوباسیون(3،2،1،0ساعت) بعد از  آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قطعه قطعه شدن DNA آپوپتوز اسپرم………………77

3-3-مقایسه مقدار P اثر زمان های مختلف انکوباسیون(3،2،1،0ساعت) بعد از  آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up  برروی قطعه قطعه شدن DNA و آپوپتوز اسپرم…………………………………..77

3-4- رابطه میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم با سایر پارامترهای اسپرم……………………………………78

3-5- رابطه میزان آپوپتوز اسپرم با سایر پارامترهای اسپرم………………………………………………………………….79

فهرست نمودارها

3-1- مقایسه میانگین حرکت پیشرونده، حرکت سریع و حرکت کند قبل و بعد از آماده سازی اسپرم به روش Swim-up……………………………………………………………………………………………………………………………….66

3-2- مقایسه میانگین قابلیت حیات و مورفولوژی اسپرم قبل و بعد از آماده سازی به روش  Swim-up…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..68

3-3- مقایسه میانگین حرکت پیشرونده و قطعه قطعه شدن DNA اسپرم قبل و بعد از آماده سازی به روش   Swim-up………………………………………………………………………………………………………………………………..70

3-4- مقایسه میانگین قطعه قطعه شدن DNA  اسپرم در زمان های مختلف انکوباسیون بعد از آماده سازی به روش  Swim-up…………………………………………………………………………………………………………………..73

3-5- مقایسه میانگین آپوپتوز  اسپرم در زمان های مختلف انکوباسیون بعد از آماده سازی به روش  Swim-up……………………………………………………………………………………………………………………………………………76

 

چکیده

یکی از علت های شکست و عدم موفقیت در تکنیک های کمک باروری(ART) قطعه قطعه شدن DNA اسپرم انسانی است، که ممکن است با انکوباسیون طولانی مدت اسپرم در دمای 37 درجه سانتی گراد به وجود آید. لذا در این مطالعه میزان قطعه قطعه شدن و آپوپتوز DNA اسپرم انسانی بعد از آماده سازی به روش Direct swim-up در زمان های مختلف انکوباسیون به وسیله تست SCD و تکنیک TUNEL مورد ارزیابی قرار گرفت.

در این مطالعه آینده نگر، بیست ویک نمونه ی اسپرم نرمال مورد مطالعه قرار گرفت. برای بررسی مورفولوژی اسپرم از رنگ آمیزی  Papanicolaou و قابلیت حیات اسپرم از رنگ آمیزی Eosin-Nigrosin  استفاده شد. نمونه ها در دمای 37 درجه سانتی گراد بعد از آماده سازی به روش Direct swim-up در زمان های مختلف انکوبه شدند. قطعه قطعه شدن DNA در فواصل زمانی مختلف (3،2،1،0 ساعت) با بهره گرفتن از تست SCD مورد بررسی قرار گرفت. اسپرم های دارای هاله بزرگ و متوسط، DNA سالم داشتند و اسپرم هایی که دارای هاله کوچک و بدون هاله بودند DNA قطعه قطعه شده داشتند. میزان آپوپتوز نیز به وسیله تکنیک TUNEL مورد ارزیابی قرار گرفت.

میانگین مورفولوژی نرمال و حرکت پیشرونده اسپرم بعد از آماده سازی به روش Direct swim-up  53/2±33/72 و 02/1±10/90 بوده است. میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم به میزان معنی داری افزایش یافت بعد از دو ساعت (935/0±81/8، 004/0 P=) و بعد از سه ساعت (894/0±76/10، 0001/0 P=) انکوباسیون نسبت به زمان صفر (809/0±38/4) بوده است. همچنین میزان آپوپتوز DNA اسپرم در زمان دو ساعت انکوباسیون نسبت به زمان صفر  (864/0±19/9، 008/0 P=) و نیز زمان سه ساعت نسبت به زمان یک ساعت ( 7/0±97/10، 002/0 P=) انکوباسیون معنی دار شده است.

در نهایت نتیجه ای که ما به آن دست یافته ایم نشان می دهد که انکوباسیون اسپرم نرمال در دمای 37 درجه سانتی گراد که به روش Direct swim-up آماده شده برای استفاده در تکنینک های کمک باروری (ART) باید زمانی کمتر از دو ساعت باشد.

واژه های کلیدی:

اسپرم نرمال، قطعه قطعه شدن DNA، انکوباسیون، تست SCD، تکنیک TUNEL.

فصل اول

مقدمه

1-1- روش های كمك باروری

امروزه استفاده از روش های كمك باروری ([1]ART) بهترین گزینه برای رفع مشكلات زوج های نابارور است. میزان موفقیت این روش ها به عوامل متعددی از جمله سلامت كامل تخمك و اسپرم بستگی دارد. در این میان سلامت ژنوم پدری اهمیت زیادی در میزان پتانسیل باروری زوج ها دارد. بنابراین آسیب DNA اسپرم یک اختلال ژنومی است كه به میزان متفاوت در مردان نابارور وجود دارد. از زمانی كه اولین گزارش در مورد آسیب DNA اسپرم منتشر شد مطالعات وسیعی در این زمینه انجام گرفته و مشخص شده كه در افراد دارای میزان بالای آسیب DNA، پارامترهای اسپرمی پایین می آید و قدرت باروری نیزكاهش می یابد.

از سالها پیش، استفاده از جراحی برای رفع نقایص ساختمان دستگاه تولید مثل، استفاده از داروهای باروری برای تحریک تخمك­گذاری و روش IUI[2] (انتقال اسپرم متحرك و شسته شده به رحم) از جمله روش­های رایج درمانی بوده و هستند. لیكن این اقدامات تنها برای گروهی از زوج­های نابارور مؤثر است. این در حالی است كه روش­های جدیدی از جمله IVF [3] و ICSI [4] امروزه به عنوان گزینه­ هایی مناسب  در درمان سایر زوجین نابارور مطرح است.

میزان موفقیتART  به سلامت و بلوغ گامت های زوجین وابسته است . طی لقاح طبیعی و روش لقاح آزمایشگاهیIVF احتمال نفوذ اسپرماتوزوای غیربالغ و ناسالم به داخل تخمك توسط سد زوناپلوسیدا به حداقل می رسد در صورتی كه در روش میكرواینجكشن یا تزریق مستقیم اسپرم به داخل سیتوپلاسم تخمك ICSI این سد وجود نداشته و ایمن بودن روش ICSI همیشه مورد نگرانی بوده است . در ضمن تحقیقات نشان داده است كه انتخاب اسپرم با پارامترهای معمولی (غلظت، مورفولوژی، تحرك ) نمی تواند گویای سلامت DNA اسپرم باشد(EI, MI, López-Fernández, Fernández, & Gosálvez, 2007).  به تازگی لوئیس و سیمون (2010) اظهار داشتند که هیچ همبستگی بین پارامتر های معمولی اسپرم و آسیب DNA وجود ندارد(S. E. M. Lewis & Simon, 2010).

یکی از روش های کمک باروری روش تلقیح داخل رحمی (IUI)  می باشد. که در این روش مایع انزالی از شوهر گرفته می شود و پس از عمل شستشو و جداسازی ، اسپرم های مرده و بدون تحرک از اسپرم های زنده و دارای تحرک جدا می شوند، سپس اسپرم های زنده و متحرک به وسیله کاتتر توسط متخصص، وارد حفره رحم می گردد.

در آزمایشگاه های ART، بعد از عمل شستشو و جداسازی معمولاَ به بررسی پارامترهای اسپرم که شامل تعداد، میزان تحرک و وضیعت مورفولوژیکی اسپرم و درصد زنده بودن می باشد، می پردازند اما به بررسی پارامترهای درون سلولی که شامل آپوپتوز و قطعه قطعه شدن DNA اسپرم است پرداخته نمی شود. همچنین در آزمایشگاه های ART معمولاَ انجام روش IUI  از 5/0 تا حداکثر 3 ساعت بعد از عمل جداسازی و شستشو اسپرم انجام می دهند و در بعضی از مراکز درمان ناباروری بدون توجه به زمان، عمل تلقیح را انجام می دهند. با توجه به نقش اسپرم در پروسه لقاح در روش IUI، لازم است که علاوه بر توجه به ساختار سلولی اسپرم به بهترین زمان ممکن جهت انجام تزریق اسپرم آماده شده به داخل حفره رحمی توجه شود. لذا با مطالعه ساختار سلولی اسپرم و نیز تعیین زمان دقیق عمل تزریق اسپرم به داخل حفره رحمی  می توان میزان لقاح و در نتیجه میزان حاملگی را افزایش داد.

یکی از عواملی که می تواند بر میزان موفقیت درمان زوج های نابارور و همچنین کیفیت گامت ها مهم باشد، کیفیت اسپرم است. در روش IUI بعد از جداسازی اسپرم از مایع منی و آماده سازی اسپرم برای انتقال، می تواند به خاطر انکوباسیون طولانی مدت، قطعه قطعه شدن DNA اسپرم افزایش پیدا کند(Muratori, et al., 2003).

مطالعات بیانگر این مطلب است كه در تخمك های لقاح یافته با اسپرم های دارای آسیب بالای DNA، میزان لانه گزینی و بارداری به طور معنی داری كاهش می یابد . اگرچه ژنوم آسیب دیده پدری، طی رشد جنینی می تواند دستخوش

چکیده

بررسی رابطه بین تقسیم سود و بازده سهام از دیرباز از جمله مشکل­ترین چالش­های پیش­ روی اقتصاددانان مالی بوده است.هدف این مطالعه نیز بررسی واکنش بازار به تغییرات سود تقسیمی(کاهش یا افزایش) می­باشد. که این کار از طریق سنجش بازده غیر عادی انباشته انجام می­ شود. خصوصاً در این مطالعه  به بررسی عوامل تأثیر­گذار بر بازده غیر عادی انباشته در دوره­ای که سود تقسیمی افزایش یا کاهش می­یابد، می­پردازیم. هدف این است که ببینیم آیا واکنش بازار به افزایش یا کاهش سود تقسیمی با گذشت زمان ضعیف می­ شود یا خیر. هدف نهایی این مطالعه این است که آیا سود تقسیمی همچنان برای سهامداران مهم است یا خیر. علاوه بر این در این تحقیق به بررسی عواملی که ممکن است روی ارزش سود تقسیمی، تأثیر بگذارند می­پردازیم. این عوامل عبارتند از: جریان نقد آزاد شرکت، نسبت بدهی، مالکیت نهادی، فرصت رشد و نقد شوندگی (گردش سهام شرکت). برای آزمون فرضیات تحقیق از دو روش رگرسیون خطی و روش داده ­های تلفیقی استفاده شد. نتایج نشان داد که بازده غیر عادی انباشته به افزایش و کاهش سود تقسیمی ارتباطی ندارد. علاوه براین نتایج نشان داد که واکنش بازار به تغییرات سود تقسیمی با متغیرهای نسبت بدهی، گردش سهام شرکت و فرصت رشد، ارتباط معنادار ولی با متغیرهای جریان نقد آزاد شرکت و مالکیت نهادی ارتباط معنی داری ندارد. علاوه بر این این نتیجه به دست آمد که بازده غیر عادی با زمان افزایش سود تقسیمی ارتباط معنی داری ندارد.هم چنین یافته­ ها نشان داد كه در روش رگرسیون بین زمان و بازده غیر عادی ارتباط معنی داری وجود دارد اما روش داده ­های تلفیقی این یافته­ را تأیید نمی­كند.

کلمات کلیدی: بازده غیر عادی، نسبت بدهی، فرصت رشد، گردش سهام، مالکیت نهادی، جریان نقد آزاد

 

 

 

 

 

                           فهرست مطالب

عنوان صفحه

. 1

1-1- مقدمه. 2

1-2- بیان مسئله. 2

1-3- اهمیت تحقیق.. 2

1-4- اهداف تحقیق.. 3

استفاده کنندگان از تحقیق.. 4

1-6- سؤال­های پژوهشی.. 4

1-7- فرضیات پژوهش… 4

1-8- قلمرو تحقیق.. 6

1-9- تعریف واژه ­ها و اصطلاحات… 6

1-10- نوع و روش تحقیق.. 6

1-11- محدودیت­های تحقیق.. 7

1-12- جمع بندی.. 8

فصل دوم: مبانی نظری و پیشینه تحقیق. 9

2-1- مبانی نظری تحقیق.. 10

2-1-1- مقدمه. 10

2-1-2-عوامل مؤثر بر تعیین سیاست توزیع سود سهام. 10

2-1-3- روش های تقسیم سود. 12

2-1-3-1 پرداخت سود نقدی.. 13

2-1-3-1-1- تقسیم مبلغ ثابت و معینی بین سهامداران.. 13

2-1- 3-1-2-تقسیم درصدی از سود ثابت… 13

2-1-3-1-3- سیاست تقسیم سود ثابت به علاوه حاشیه متغیر.. 14

2-1-3-1-4- سیاست تقسیم سود مازاد. 14

2-1-3-2- سهام جایزه. 15

2-1-3-3- تجزیه سهام. 15

2-1-4- چرا شرکتها سود تقسیم می­نمایند. 16

2-1-5-سیاست تقسیم سود در جهان واقعی.. 17

2-1-5-1- سیاست تقسیم سود در آمریکا 17

2-1-5-2- پرداخت سود تقسیمی در خارج از آمریکا 18

2-1-6-مقررات قانونی در خصوص تقسیم سود. 19

2-1-7- دیدگاه ­های مختلف دربارۀ سیاست پرداخت سود سهام. 21

2-1-7-1- نظریۀ سنتی.. 22

2-1-7-2- مدل والتر.. 24

2-1-7- 3-مدل گوردون.. 25

2-1-7-3-1- مدل تجدید نظر شده گوردون.. 27

2-1-7-4- قضیه مودیلیانی و میلر.. 27

2-1-7-5- قضیه رادیکال.. 28

2-1-7-6- توسعه های تئوریک اخیر.. 29

2-1-8- نکات عمده در سیاست تقسیم سود. 30

2-1-8-1- عدم تقارن اطلاعاتی.. 30

2-1-8-2- مشکلات نمایندگی.. 31

2-1-8-3- محدودیت های نهادی.. 31

2-1-8-4- انتقال دارائی.. 32

2-1-8-5- هزینه های معاملاتی.. 32

2-1-8-6- موضوعات رفتاری.. 32

2-1-8-7- ملاحظات مالیاتی  و بازخرید سهام. 33

2-1-8-9- دلیل این مطالعه. 34

2-2- پیشینه تحقیق.. 35

2-2-1- عدم تقارن اطلاعاتی و علامت دهی.. 35

2-2-2- هزینۀ نمایندگی.. 41

2-2-2-1- الگوی اساسی نمایندگی.. 42

2-2- 3-مدل­های مشتری سود تقسیمی.. 46

2-2-4- توضیحات مالی رفتاری برای تقسیم سود. 49

2-2-5- پژوهشهای انجام شده در ایران.. 51

2-2-6-مبانی تدوین فرضیه ­ها 53

2-2-6-1- محتوای اطلاعاتی.. 53

2-2-6-2- سطح جریانات نقد آزاد. 54

2-2-6-3- مالکیت نهادی.. 55

2-2-6-4- سطح بدهی.. 56

 

2-2-6-5- نسبت q توبین شرکت… 57

2-2-6-6 نقدشوندگی بازار سهام شرکت… 57

2-2-6-7- واکنش بازار در طی زمان.. 58

فصل سوم : کلیات و طرح تحقیق 60

3-1-روش تحقیق.. 61

3-2- جامعه آماری و نمونه آماری.. 62

3-3- متغیرهای تحقیق.. 65

3-3-1- واکنش بازار.. 65

3-3-1-1- بازده غیر عادی.. 65

3-3-1-1-1-مدل تعدیل شده بازار.. 65

3-3-1-1-2-مدل بازار.. 65

3-3-1-1-3-مدل CAPM… 66

3-3-1-1-4- مدل فاما و فرنچ.. 66

3-3-1-2- استفاده از مدل تعدیل شده بازار.. 66

3-3-1-3- دلایل استفاده از مدل تعدیل شده بازار.. 67

3-3-1-4- بازده غیر عادی.. 68

3-3-1-5- بازده غیر عادی انباشته. 69

3-3-2- درصد تغییر در سود نقدی.. 69

3-3-3- جریان نقد آزاد. 69

3-3-4- نسبت بدهی به حقوق صاحبان سهام. 71

3-3-5- نقدشوندگی.. 72

3-3-6- مالکیت نهادی.. 72

3-3-7- فرصت رشد. 73

3-4- ابزارها و روش­های جمع­آوری داده ­ها 74

3-5- روش تجزیه و تحلیل داده ها و اطلاعات… 74

3-5- 1-رگرسیون خطی.. 74

3-5- 1-1-آزمون دوربین – واتسون.. 75

3-5- 1-2-بررسی نرمال بودن خطاها 75

3-5- 1-3- آزمون هم خطی.. 76

3-5- 1-4- راه حل های رفع هم خطی.. 76

3-5- 2- تخمین از  طریق روش داده ­های تلفیقی.. 77

3-5- 2-1- مزایای استفاده از داده‌های تابلویی.. 78

3-5- 2-2- داده های تلفیقی متوازن و غیر متوازن.. 79

3-5- 2-3- مدل كلی داده‌های تابلویی.. 79

3-5- 2-3- تخمین زن های اثرات ثابت و تصادفی.. 81

3-5- 2-5- تشخیص استفاده از روش­ اثرات ثابت یا اثرات تصادفی.. 85

3-5- 2-5-1- آزمون F (آزمون برابری عرض از مبداء ها). 85

3-5- 2-5-2- آزمون هاسمن: انتخاب بین اثرات ثابت یا تصادفی.. 87

3-6- جمع بندی.. 88

. 90

4-2- آمار توصیفی.. 90

4-2-1- متغیر­های مورد استفاده. 90

4-2-2- فراوانی شرکت­های مورد بررسی.. 91

4-2-3- آمار توصیفی هر یک از متغیرها 91

4-3-بررسی مفروضات رگرسیون.. 92

4-3-1-آزمون هم­خطی.. 92

4-3-2-آزمون استقلال خطاها 93

4-3-3-بررسی نرمال بودن توزیع  پسماندها.. 93

 4-4- آزمون فرضیات… 94

4-5- نتایج آزمون فرضیات… 95

4-5-1- آزمون فرضیه اول.. 95

4-5-2- آزمون فرضیه 2.. 96

4-5- 3-آزمون فرضیه 3 و 4.. 97

4-5-4- آزمون فرضیه 5 و 6.. 97

4-5-5- آزمون فرضیه 7 و 8.. 98

4-5-6- آزمون فرضیات 9 و 10.. 99

4-5-7- آزمون فرضیات 11 و 12.. 100

4-5-8- آزمون فرضیات 13 و 14.. 101

4-6-جمع­بندی.. 101

. 103

5-1- مقدمه. 104

5-2- نتایج حاصل از بررسی سؤال­ها و فرضیه ­های پژوهشی.. 104

5-2- 1-نتایج حاصل از فرضیات اول و دوم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 105

5-2-2- نتایج حاصل از فرضیات سوم و چهارم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 106

5-2-3- نتایج حاصل از فرضیات پنجم و ششم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 106

5-2-4- نتایج حاصل از فرضیات هفتم و هشتم مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 107

5-2-5- نتایج حاصل از فرضیات نهم و دهم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 107

5-2-6- نتایج حاصل از فرضیات یازدهم و دوازدهم و مقایسه نتایج با سایر تحقیقات انجام شده. 107

5-2-7-نتایج حاصل از فرضیات سیزدهم وچهاردهم و مقایسه نتایج باسایر تحقیقات انجام شده. 108

5-3-پیشنهادات کاربردی.. 108

5-4- پیشنهادات برای تحقیقات آینده. 108

پیوست­ها. 110

. 118

 

 

 

فهرست شکل­ها

عنوان                                                                                                         صفحه

شکل2 -1- فرایند پرداخت سود سهام. 20

شکل 2-2- مکاتب فکری در تقسیم سود. 22

شکل 2-3- روابط نمایندگی. 42

شکل 3-1- نمایش مراحل کلی انجام پژوهش. 64

 

 

 

 فهرست جدول­ها

عنوان                                                                                                         صفحه

جدول 4-1- تعریف متغیر­های تحقیق. 90

جدول4-2- فراوانی شرکت­های مورد بررسی در هر یک از فرضیات  91

جدول 4-3- آمار توصیفی هر یک از متغیرها. 91

جدول 4-4- بررسی استقلال متغیرهای تحقیق. 92

جدول 4-5- آزمون استقلال خطاها. 93

جدول 4-6- ارزش زمان. 95

جدول 4-7- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه 1. 95

جدول 4-8- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه 2. 96

جدول 4-9- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه ­های 3 و 4. 97

جدول 4-10- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه ­های 5 و 6. 98

جدول 4-11- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه ­های 7 و 8. 98

جدول 4-12- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه ­های 9 و 10. 99

جدول 4-13- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه ­های 11 و 12  100

جدول 4-14- خلاصه نتایج حاصل از آزمون فرضیه ­های 13 و 14  101

 

 

 

 

 

 

فصل اول

کلیات تحقیق